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細胞/基因治療:AAV滴度檢測試劑盒和分離液

作者:admin信息來源:達科為日期:2019年03月20日打印字體:  
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腺相關(guān)病毒(AAV)是歐盟FDA最早認證的基因治療載體。AAV的幾大特點是其在臨床和研究中廣泛應(yīng)用的基礎(chǔ):安全、宿主范圍廣、低免疫原性、長期穩(wěn)定表達外源基因、良好的擴散性能和物理性質(zhì)穩(wěn)定等。而且,越來越多的臨床試驗證明了AAV載體的有效性和良好的安全性,使之成為基因治療研究的熱點,并被認為是介導(dǎo)基因治療的理想載體之一。

One-stepgeneration of modular CAR-T cells with AAVCpf1

作者利用腺相關(guān)病毒( AAV )CRISPR -Cpf1系統(tǒng),開發(fā)了一種高效的制備的Car-T的方法,而且具有顯著增強的特征。該技術(shù)使得Car-T制備的高效性大大提高。

目前發(fā)現(xiàn)的AAVAAV1~AAV11、DJ12種不同的血清型,主要區(qū)別在于衣殼蛋白Cap的不同,并決定不同血清型AAV對不同的組織和細胞有不同的感染效率。

12種不同血清型AAV對個組織器官細胞的親和性


Progen可提供最常用的AAV血清型的ELISA滴度檢測試劑盒。該ELISA試劑盒的捕獲抗體經(jīng)過獨特設(shè)計,只識別野生型、重組型或者組裝的空AAV質(zhì)粒,而不會試別未組裝的質(zhì)粒蛋白,因此結(jié)果準確,可重復(fù)性高。ATCCprogenAAV滴度檢測試劑盒寫入了他們的methodology哦。


達科為還提供AXIS-SHIELD OptiPrep?分離液,particle number ratios 比CsCl梯度分離的至少高100倍,是病毒分離的理想選擇,為AAV分離提供更好的工具。

CAT# AS1114542


AAV滴度檢測試劑盒以及檢測抗體(Progen可提供用于IHC、WBELISA的抗體)相關(guān)文獻:

1 Grimm D, Kern A,Pawlita F, Ferrari F, Samulski R and Kleinschmidt J. Titration of AAV-2particles via a novel capsid ELISA: packaging of genomes can limit productionof recombinant AAV-2. Gene Therapy 6:132-1330 (1999).

2 Kuck, D., Kern,A. & Kleinschmidt, J. A.?Development of AAV serotype-specific ELISAs usingnovel monoclonal antibodies.?J. Virol. Methods?140,?17–24 (2007).

3 Sonntag, F.?etal.?The Assembly-Activating Protein Promotes Capsid Assembly of DifferentAdeno-Associated Virus Serotypes.?J. Virol.?85, 12686–12697 (2011).

4 Lock M, McGorrayS, et al. Characterization of a recombinant Adeno-Associated Virus Type 2reference standard material; Hum Gene Therapy 21:1273-1285 (2010).

5 Gurda, B. L.?etal.?Mapping a neutralizing epitope onto the capsid of adeno-associated virusserotype 8.?J. Virol.?86, 7739–7751 (2012).

6 Mietzsch,M. et al. OneBac: platform for scalable and high-titer production ofadeno-associated virus serotype 1-12 vectors for gene therapy.?Hum. Gene Ther.25,?212–22 (2014)

7 Ayuso, E.?etal.?Manufacturing and characterization of a recombinant adeno-associated virustype 8 reference standard material.?Hum. Gene Ther.?25, 977–987 (2014).

8 D’Costa, S.?etal.?Practical utilization of recombinant AAV vector reference standards: focuson vector genomes titration by free ITR qPCR.?Mol. Ther. Methods Clin. Dev.?5,16019 (2016).



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